Chromatographic Determination of Riboflavin in the Presence of Tetracyclines in Skimmed and Full Cream Milk using Fluorescence Detection

Foi estabelecido um método cromatográfico rápido e simples para a determinação de riboflavina em leite bovino, na presença de tetraciclinas. Para tanto, as proteínas foram precipitadas com ácido tricloroacético e a separação realizada por CLAE em fase reversa com detector de fluorescência. Foi utilizada uma coluna C 8 com eluição isocrática e fase móvel acetato de sódio 0,1 mol L, cloreto de cálcio 35 mmol L, EDTA 25 mmol L: metanol (65:35 v/v). O método foi validado mediante avaliação dos seguintes parâmetros: linearidade (0,9980), faixa linear (0,50 a 1,30 μg mL), precisão intra e inter-ensaio (RSD ≤ 0,5%), exatidão (recuperação 92%) e limites de detecção e de quantificação (0,75 μg mL e 0,22 μg mL, respectivamente). O método foi aplicado na análise de leite integral e desnatado, mostrando-se robusto na presença de substâncias fluorescentes como as tetraciclinas, e quando comparado com o método espectrofluorimétrico, não revelou diferença significativa (p≤ 0,05) entre os resultados obtidos.